最近有個客戶表示自己是剛剛接觸化測的藥廠化驗員,最近在用微生物限度檢測儀做純化水的微生物檢測,他想問問,純化水微生物限度檢查法具體是如何做的。這個好像藥典有,但他沒找著。希望我們能指點一下!
大概就是把純化水永薄膜過濾器濾過,把薄膜放入培養基中培養,但是,他想知道具體一點的。下面我們上海恩計小編就針對客戶提出的這個純化水微生物限度檢查法怎么操作的做出具體回答。
一、純化水進行微生物限度檢查的原因
在醫藥的生產過程中,純化水的質量是關系到藥品質量的一個首要原因。純化水在生產,儲存和運輸的過程中,非常容易受到微生物的污染,因此對于水質的日常檢測是質量部門一個重要工作。對于純化水微生物限度檢查,各國所使用的方法不外乎與培養基澆注法,涂布法,膜過濾法,以及最大可能數法,最大的區別在于所使用的培養基不同。
二、采用微生物限度檢查薄膜過濾法的優點
采用濾膜法進行微生物檢測是一種國際公認的微生物標準檢驗方法,其得到AOAC、美國、歐洲和日本等國家的藥典、FDA和EPA等組織的承認,廣泛應用于環境監測、食品及飲料工業、化妝品、制藥工業品質控制和電子工業等領域。賽多利斯公司的濾膜法微生物檢測產品成功地應用于濾膜法已有20多年的歷史,實用而且方便實用,它簡化了微生物檢測程序。
濾膜法微生物檢測:
將適當孔徑的濾膜放入濾器,過濾樣品,由于濾膜的作用而將微生物保留在膜的表面上。樣品中微生物生長抑制劑可在過濾后用無菌水沖洗濾器而除去。然后,將濾膜放在培養基上培養,營養物和代謝物通過濾膜的微孔進行交換,在濾膜表面上培養出的菌落可以計數,并和樣品量相關。
濾膜法的優點:
- 與直接法比較,可以檢測大量的樣品
- 濃縮效應使微生物檢測的準確度提高
- 帶有菌落的濾膜,可作為檢測的永久記錄存檔
- 可見的菌落和樣品量直接對應,得出定量結果
操作具體一點就是:薄膜過濾法檢測,一個樣過濾一份,就是200ml的純化水通過濾膜,將該濾膜浸泡在滅菌好的l生理鹽水中,再接種到平皿中,制成10級、100級、1000級稀釋倍數的細菌、霉菌和酵母菌稀釋培養皿,即可
三、純化水微生物限度檢查法(薄膜過濾法)操作步驟
1、取相當于每張濾膜含1g或1ml供試品的供試液,加至適量的稀釋劑中,混勻,過濾。若供試品每1g或1ml所含的菌數較多時,可取適量稀釋劑的供試液1ml過濾。用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液或其他適宜的沖洗液沖洗濾膜,沖洗方法和沖洗量同“計數方法的驗證”。沖洗后取出濾膜,菌面朝上貼于營養瓊脂培養基或玫瑰紅鈉瓊脂培養基或酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養基平板上培養。每種培養基至少制備一張濾膜。
2、陰性對照試驗 取試驗用的稀釋液1ml,照上述薄膜過濾法操作,作為陰性對照。陰性對照不得有菌生長。
3、培養和計數 除另有規定外,細菌培養48小時,逐日點計菌落數,一般以48小時的菌落數報告;霉菌、酵母菌培養72小時,逐日點計菌落數,一般以72小時的菌落數報告;必要時,可適當延長培養時間至5~7天進行菌落計數并報告。菌落蔓延生長成片的平板不宜計數。點計菌落數后,計算各稀釋級供試液的平均菌落數,按菌數報告規則報告菌數。若同稀釋級兩個平板的菌落平均數不少于15,則兩個平板的菌落數不能相差1倍或以上。
4、菌數報告原則 以相當于1g或1ml供試品的菌落數報告菌數;若濾膜上無菌落生長,以<1報告菌數(每張濾膜過濾1g或1ml供試品),或<1乘以稀釋倍數的值報告菌數。
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